Исследование парамагнитных свойств суммарных липидов морских организмов

от

 Ю.А. Усс1, Б.Н. Крашенинников2, В.Т. Минлигареев3

 1Филиал Московского государственного университета им. М.В. Ломоносова в г. Севастополе,

РФ, г. Севастополь, ул. Героев Севастополя, 7

E—mail: ussyuri@gmail.com

2 Институт природно-технических систем, РФ, г. Севастополь, ул. Ленина, 28

E—mail: Bnk58@mail.ru

3Институт прикладной геофизики имени академика Е.К. Фёдорова, РФ, г. Москва, ул. Ростокинская, 9

E—mail: metrologeo@mail.ru

 DOI: 10.33075/2220-5861-2018-4-138-142

УДК 577.352.3                                   

Реферат:

     В представленной работе приводятся результаты дальнейшего исследования ранее обнаруженных методом ЭПР (электронного парамагнитного резонанса) парамагнитных центров в суммарных липидных экстрактах из тканей Mytilus galloprovincialis L. (гонады) и Squalus achantias (печень).

      Целью работы была проверка влияния новой процедуры экстракции суммарных липидов на наличие и параметры спектра ЭПР.

  Ткани   исследуемых морских гидробионтов перед экстракцией замораживали в морозильной камере при -200С в течение 2 часов. После размораживания ткани гомогенизировались в фарфоровой ступке до сметанообразного состояния и заливали смесью очищенных гексана и изопропанола (2:1). Соотношение ткань/экстракционная смесь (г/мл) 1:10. Такое соотношение ткань-экстрагент является оптимальным, и полнота экстракции составляет 97–98 %. Экстракцию проводили в стеклянных центрифужных пробирках объемом 100 мл. Осветление экстракта и отмывку дважды дистиллированной водой в соотношении 1:2 (липидный экстракт:вода) проводили центрифугированием при 3000 об. /мин при температуре +40С. Отмытый экстракт липидов в гексане упаривали на роторном испарителе в вакууме при температуре +300С и перерастворяли в гексане.

   При окислении липидных экстрактов Mytilus galloprovincialis L. (гонады) и Squalus achantias диоксидом свинца в толуоле были зафиксированы идентичные хорошо   разрешенные       спектры ЭПР.

       Были сделаны следующие выводы:

– описанный метод экстракции суммарных липидов может послужить основой для разработки оптимальной схемы выделения активного вещества с сохранением его антиокислительной активности для изучения молекулярной структуры и функциональной роли в клеточных структурах;

– вероятная модель редокс-фрагмента природного стабильного свободного радикала представляет собой гетероцикл с двумя близко   расположенными атомами азота (например, как в пиримидине), которые связаны резонансной проводимостью.

Ключевые слова: одноэлектронный перенос, свободные радикалы, перекисное окисление липидов, липиды морских гидробионтов, ЭПР-спектроскопия, стабильный свободный радикал.

Полный текст в формате PDF

СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ

  1. Свободные радикалы в биологии / под ред. У. Прайора. М.: Мир, 1979. Т.  1, 2. 318 с., 328 с.
  2. Охлобыстин О.Ю. Перенос электрона в органических реакциях. Ростов на/Д.: Изд-во Рост. ун-та, 1974. 118 с.
  3. Чупахин О.Н. Одноэлектронный перенос в органической химии // Соросовский образовательный журнал. 2001. Т. 7, № 10. С. 33–37.
  4. Владимиров Ю.А. Свободные радикалы в биологических системах // Соросовский образовательный журнал. 2000. Т. 6, № 12. С. 13–19.
  5. Владимиров Ю.А., Арчаков А.И. Перекисное окисление липидов в биологических мембранах. М.: Наука, 1972. 252 с.
  6. Владимиров Ю.А., Азизова О.А., Деев А.И.Свободные радикалы в живых системах // Итоги науки и техники. Серия биофизика. М.: ВИНИТИ, 1992. Т.52. 250 с.
  7. Владимиров Ю.А.Нарушение барьерных свойств внутренней и наружной мембран митохондрий, некроз и апоптоз // Биологические мембраны. 2002. Т. 19, № 5. С. 355–377.
  8. Vladimirov Y.A., Proskurnina E.V. Free radicals and cell chemiluminescence // Biochemistry (Moscow). 2009. Vol. 74. No. 13. P. 1545–1566.
  9. Блюменфельд Л.А., Воеводский В.В., Семенов А.Г. Применение электронного парамагнитного резонанса в химии. Новосибирск: Изд-во Сиб. отд-ния АН СССР, 1962. 240 с.
  10. Блюменфельд Л.А., Тихонов А.Н. Электронный парамагнитный резонанс // Соросовский образовательный журнал. 1997. № 9. С. 91–99.
  11. Современные методы биофизических исследований: практикум по биофизике: учеб. пособие для биол. спец. вузов / А.А. Булычев, В.Н. Верхотуров, Б.А. Гуляев [и др.] / под ред. А.Б. Рубина. М.: Высш. шк. 1988. 359 с.
  12. Стабильный радикал из липидных экстрактов морских организмов / М.В. Нехорошев, Ю.А. Усс, Е.С. Климов [и др.] // Докл. АН УССР. Сер. Б. Геол., хим. и биол. науки, 1989. № 10. С. 78–79.
  13. Folch J., Lees M., Sloane Stanley G.H. A simple method for the isolation and purification of total lipides from animal tissues // J. biol. Chem., 1957. Vol. 226. P. 497–509.
  14. Экстракция липидов для комплексной количественной оценки свободнорадикального окисления / В.П. Верболович, Ю.К. Подгорный, Л.Л. Теплова [и др.] // Лабораторное дело. 1989. № 12. С. 57–59.

Loading